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CCK8檢測細胞增殖/毒性的注意事項有哪些?

發(fā)布時間:2020-12-28

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  上期我們了解了什么是CCK8,以及CCK8的優(yōu)點是哪些,這期上海儒安主要給大家科普一下CCK8檢測細胞增殖/毒性的注意事項。

  1.酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾,可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。

  2.CCK8可以檢測大腸桿菌,但不能檢測酵母細胞。在細胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細菌污染,以免影響結(jié)果。

  3.當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時,培養(yǎng)板很外一圈的孔很容易干燥揮發(fā),由于體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下,很外一圈的孔只加培養(yǎng)基,不作為測定孔用。

  4.在培養(yǎng)基中加入CCK8,培養(yǎng)一定的時間,測定450 nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時,還應(yīng)考慮藥物的吸收,可在加入藥物的培養(yǎng)基中加入CCK8,培養(yǎng)一定的時間,測定450nm的吸光度作為空白對照。

  5.金屬對CCK8顯色有影響:當(dāng)終濃度為1 mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會壓制5%、15%、90%的顯色反應(yīng),使靈敏度降級。如果終濃度是10 mM的話,將會100%壓制。

  6.懸浮細胞由于染色比較困難,一般需要增加細胞數(shù)量和延長培養(yǎng)時間。

  以上這些就是大家在使用CCK8的時候需要注意的一些事項,想要了解更多,歡迎大家關(guān)注上海儒安生物科技有限公司。
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